你是按这个程序操作AFT免疫亲和柱的吗?
点击次数:1256 更新时间:2021-01-07
AFT(aflatoxin)免疫亲和柱产品概述:
AFT(aflatoxin)是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒性的代谢产物,是一种毒性*的物质,具有很强的致癌性。AFT(aflatoxin)的危害性在于对人及动物肝脏组织的破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以AFT(aflatoxin)B1常见,其毒性和致癌性也是*的。在玉米、花生、小麦、棉花种子和一些干果中常能检测到AFT(aflatoxin)B1。
反应原理:
AFT(aflatoxin)B1免疫层析亲和柱测定的原理是抗原抗体反应。AFT(aflatoxin)B1单克隆抗体固定于柱内凝胶上,样品中的AFT(aflatoxin)B1经过提取、过滤、稀释,然后缓慢通过AFT(aflatoxin)B1免疫亲和柱,在柱内AFT(aflatoxin)B1与抗体特异性结合,之后洗涤免疫亲和柱,除去未结合的其他物质。用甲醇洗脱AFT(aflatoxin)B1,注入到分析仪器中进行检测。
![](http://img76.chem17.com/9/20210107/637456318850732584563.jpg)
AFT(aflatoxin)免疫亲和柱的操作程序:
1、连接:将免疫亲和柱后盖取下,用剪刀剪开,重新盖上,连接于泵流操作架的30mL注射器下;
2、上样:移取上述提取液移至注射器内,打开下端堵头;
3、富集:将空气压力泵与注射器连接,调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱,建议重力过柱;
4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗,弃去全部流出液,并使2-3mL空气通过柱体;
5、洗脱:为保证洗脱充分,以2.0mL色谱级甲醇进行洗脱,重力洗脱即可。先,将免疫亲和柱内液体排干,加1.0mL甲醇于柱管内,重力过柱,当溶剂通过柱子后;再加入1.0mL甲醇重复上述洗脱步骤,后轻微加压排净洗脱液,合并洗脱液,将洗脱液浓缩吹干,用1mL流动相复溶,涡旋30s溶解残余物,0.22μm滤膜过滤,待测。